小鼠胃病模型構(gòu)建

一、小鼠胃病模型構(gòu)建常見胃病模型類型

1. 化學(xué)誘導(dǎo)模型

• 乙醇誘導(dǎo)急性胃黏膜損傷

• 步驟：禁食24小時(shí)后，灌胃給予無水乙醇（0.5-1 mL/只）。

• 特點(diǎn)：6小時(shí)后可見胃黏膜充血、糜爛，適合研究急性胃損傷修復(fù)。

• 吲哚m辛（NSAIDs）誘導(dǎo)胃潰瘍

• 步驟：皮下注射吲哚m辛（10-20 mg/kg）或灌胃給藥，24-48小時(shí)后觀察。

• 機(jī)制：抑制前列腺素合成，導(dǎo)致胃黏膜防御功能下降。

2. 幽門螺桿菌（H. pylori）感染模型

• 菌株：SS1或臨床分離株（需適應(yīng)小鼠胃環(huán)境）。

• 步驟：

1. 禁食4小時(shí)后，灌胃給予H. pylori懸液（10?-10? CFU/只，每周2次，連續(xù)3次）。

2. 感染后8-12周評估（慢性胃炎、腸化生）。

• 檢測：胃組織PCR（ureA基因）、Warthin-Starry銀染色（細(xì)菌定植）、組織病理評分。

3. 手術(shù)模型

• 醋酸誘導(dǎo)慢性胃潰瘍：

• 開腹暴露胃，濾紙片浸漬50%醋酸貼敷胃漿膜面30秒，術(shù)后7-14天形成潰瘍。

4. 基因修飾模型

• 轉(zhuǎn)基因小鼠：如胃酸分泌相關(guān)基因（H+/K+-ATPase β亞基敲除）。

• 致癌模型：

• MNNG（N-甲基-N'-硝基-N-亞x基胍）誘導(dǎo)胃癌：0.1% MNNG飲水喂養(yǎng)6-12個(gè)月。

二、小鼠胃病模型構(gòu)建關(guān)鍵操作流程（以H. pylori感染為例）

1. 預(yù)處理：

• 小鼠禁食4小時(shí)，減少胃酸分泌。

2. 感染：

• 灌胃給予H. pylori懸液（含5% NaHCO?中和胃酸，提高定植率）。

3. 監(jiān)測：

• 體重與攝食量：每周記錄，評估全身影響。

• 胃病理：HE染色（炎癥評分）、Giemsa染色（細(xì)菌定植）。

• 免疫應(yīng)答：ELISA檢測血清IL-1β、TNF-α。

三、評估方法

1. 大體觀察：

• 解剖后測量潰瘍面積（mm2）或計(jì)算潰瘍指數(shù)（0-4分）。

2. 組織學(xué)分析：

• HE染色：評估炎癥細(xì)胞浸潤、黏膜厚度、糜爛深度。

• 特殊染色：PAS染色（黏液層厚度）、Masson染色（纖維化）。

3. 分子檢測：

• qPCR檢測炎癥因子（IL-6、IL-8）、胃功能標(biāo)志物（胃泌素、生z抑素）。

四、注意事項(xiàng)

1. 動物選擇：

• C57BL/6小鼠對H. pylori敏感；BALB/c易形成嚴(yán)重炎癥。

2. 感染優(yōu)化：

• 使用新鮮培養(yǎng)的H. pylori（對數(shù)生長期），避免胃酸中和不足。

3. 倫理終點(diǎn)：

• 體重下降>20%或嚴(yán)重出血時(shí)需人道處理。

五、模型局限性

• 小鼠胃解剖結(jié)構(gòu)與人類差異（無主細(xì)胞、胃酸分泌模式不同）。

• 化學(xué)誘導(dǎo)模型多為急性損傷，難以模擬慢性病變。