肥胖動物模型構建

一、肥胖背景簡介

 肥胖（obesity）是指一定程度的明顯超重與脂肪層過厚，是體內(nèi)脂肪，尤其是甘油三酯積聚過多而導致的一種狀態(tài)。由于食物攝入過多或機體代謝的改變而導致體內(nèi)脂肪積聚過多，造成體重過度增長，并引起人體病理、生理改變或潛伏。隨著人們生活水平的提高,飲食因素成為誘發(fā)肥胖的重要因素之一。

二、肥胖模型簡介

 肥胖動物模型構建主要通過特定的飼養(yǎng)方式或遺傳改造使動物產(chǎn)生肥胖癥狀，從而模擬人類的肥胖狀態(tài)，用于研究肥胖的發(fā)病機制、相關疾病的發(fā)展以及潛在的治療方法。

三、肥胖動物模型構建方法

3.1、實驗動物

  C57小鼠

3.2、實驗材料

  高糖高脂飼料

3.3、模型構建  

藥物誘導

1. 谷an酸鈉（MSG）誘導

新生小鼠或大鼠皮下注射MSG可誘導其產(chǎn)生肥胖。

高劑量谷an酸鈉可以損傷下丘腦弓狀核及其鄰近區(qū)域，導致攝食及能量代謝紊亂，引起肥胖。谷an酸鈉誘導的肥胖會出現(xiàn)高血糖、高脂血癥和胰島素抵抗，但這種方法會抑制肝脂質(zhì)沉積，所以除了肥胖外它還可以用作非酒精性脂肪肝的動物模型。

實驗方法：新生ICR乳鼠自出生當天開始每日注射谷an酸鈉（MSG）連續(xù)4ｄ，每籠1只母鼠喂養(yǎng)乳鼠3～6只，飼以基礎飼料，任意飲氯化水，置于標準動物室。在6周齡時連續(xù)4ｄ測定每籠攝入和散落的飼料量，計算平均飼料和水攝入量·鼠。實驗期間定時測定尿糖、血糖、胰島素、總膽gu醇（TC），TG，低密度脂蛋白-膽gu醇（LDL-C）、高密度脂蛋白-膽gu醇（HDL-C）、谷草轉氨酶（AST）、谷丙轉氨酶（ALT）以及做糖耐量試驗、胰島素耐受試驗?并測量小鼠從口至肛men的長度、稱重。用方程式：體重（ｇ）／體長2（ｃｍ2）計算身體質(zhì)量指數(shù)（BMI）。實驗末所有小鼠取肝、胰、腎、眼、坐骨神經(jīng)、內(nèi)臟白色脂肪組織、肩胛間棕色脂肪組織、主動脈和大腦稱重，然后作病理檢查。

2. 金硫葡萄糖（GTG）致肥胖

給成年小鼠腹腔注射GTG可誘導其產(chǎn)生肥胖，金硫葡萄糖是損傷下丘腦腹內(nèi)側核，增加食欲引起肥胖。其作用機制尚不明確且金硫葡萄糖價格高昂、造模時間長且腹腔注射動物死亡率高限制了它的應用。

這種動物的血糖升高，血清胰島素水平也升高；從其胰島分離的細胞的胰島素合成顯著增加cAMP含量和葡萄糖氧化亦顯著增加。胰島素敏感性受抑制，胰島肥大伴脫顆粒，提示該肥胖與B細胞反應改變有關。

研究發(fā)現(xiàn)，在注射GTG后2周，動物心臟對葡萄糖致丙酮酸脫氫酶升高的反應減弱，在WAT和BAT升高2～3倍，而這些反應在給藥后5～10周消失。肝中糖元儲存增加，磷酸化酶的激活及磷酸葡萄糖均顯著增加，這可能與胰島素抵抗及葡萄糖耐量異常有關。

四、模型驗證

①一般情況觀察:每天觀察動物的精神狀態(tài)、皮毛光澤、活動、食欲、大便等情況，并詳細記錄。

②體重:每周稱重1次。

③體長及Lee's指數(shù):實驗結束時，麻醉后測量體長(大鼠從鼻至肛men的長度)，并根據(jù)公式［Lee's指數(shù)=體重(g)1/3×103/體長(cm)］計算Lee's指數(shù)。

④脂肪濕重及脂肪指數(shù):實驗結束時，取體脂(網(wǎng)膜、睪周及腎周脂肪)并稱重，計算脂肪指數(shù)。脂肪指數(shù)(%)=(腎周脂肪+睪周脂肪+網(wǎng)膜脂肪)/體重×100。

⑤血脂測定:實驗結束時，大鼠經(jīng)24h禁食麻醉自頸動脈采血，離心并分離出血清，用全自動生hua分析儀檢測血清總膽gu醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白膽gu醇(HDL－C)和低密度脂蛋白膽gu醇(LDL－C)水平。

⑥肝脂測定:取肝臟左葉重約1g，在1∶9勻漿介質(zhì)(甲醇∶yi醚=1∶1)中，以電動勻漿機4℃下制成10%勻漿，4℃下4000r/min離心10min，提取上清液，采用全自動生hua分析儀檢測TC、TG。

五、小結

 高營養(yǎng)飼料飼喂法制作營養(yǎng)性肥胖大鼠模型造模方法簡單可靠，成本低，模型穩(wěn)定，適用性強，造模成功率高，一定程度上復制了人類單純性肥胖發(fā)病狀況。常見的動物模型有小鼠和大鼠等

六、參考文獻

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