油紅O脂肪染色

油紅O染色是鑒定間充質(zhì)干細(xì)胞向成脂細(xì)胞分化的一個(gè)重要指標(biāo)。用特定的成脂誘導(dǎo)培養(yǎng)基（貨號(hào)：CTCC-JD003）培養(yǎng)一段時(shí)間后 ，間充質(zhì)干細(xì)胞可分化為成脂細(xì)胞，并在細(xì)胞中形成脂滴。油紅O屬于偶氮染料，是很強(qiáng)的脂溶劑和染脂劑，與甘油三酯結(jié)合呈小脂滴狀。脂溶性染料能溶于細(xì)胞中的脂滴。當(dāng)染料加入細(xì)胞中，染料則離開(kāi)染液而溶于細(xì)胞內(nèi)的脂滴中，使細(xì)胞內(nèi)的脂滴星紅色或橘紅色。
 

油紅O工作液制備：

油紅染色液與染色稀釋液按照3:2的比例進(jìn)行稀釋?zhuān)靹蚝笫覝仂o置10min，濾紙過(guò)濾；

移除孔內(nèi)培養(yǎng)基，每孔加入2ml洗滌液1號(hào)靜置1min后移除，洗滌2次；

每孔加入2ml固定液，37°C (或室溫)固定30min ；

移除固定液。每孔加2ml洗滌液1號(hào)沖洗，洗滌2次；

每孔加入油紅O工作液2ml，37°C (或室溫)染色10-20min ；

每孔加入洗澡液3號(hào)2ml，快速移除，根據(jù)染色背景情況可重復(fù)1-2次；

每孔加洗滌液2號(hào)2ml，洗2次后顯微鏡下觀察。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果：脂滴呈橘紅色至鮮紅色，細(xì)胞核呈深藍(lán)色。